En Puerto Rico, se ha identificado una mutación particular en el gen RSPH4A que está presente en casos de Disquinesia Ciliar Primaria. Sin embargo, los recursos para diagnosticar esta enfermedad son limitados, lo que impide diagnósticos tempranos.
En un esfuerzo conjunto, investigadores de Ponce Health Sciences University y la Universidad de Puerto Rico en Mayagüez han desarrollado un ensayo basado en manchas de sangre seca (DBS, por sus siglas en inglés).
El estudio busca validar un método innovador y más accesible para detectar la mutación genética (llamada RSPH4A) asociada a la Disquinesia Ciliar Primaria (PCD) en la población de Puerto Rico.
Esta enfermedad rara afecta la función de los cilios móviles, estructuras diminutas que ayudan a limpiar las vías respiratorias. Sin diagnóstico y tratamiento tempranos, puede causar infecciones respiratorias crónicas, daño pulmonar irreversible y otros problemas de salud.
La PCD es un trastorno genético causado por defectos en la estructura y función de los cilios móviles.
Estas anomalías afectan la limpieza de las vías respiratorias, lo que conduce a infecciones respiratorias crónicas, sinusitis, bronquiectasias progresivas e incluso infertilidad. En Puerto Rico, investigaciones previas han identificado cuatro mutaciones específicas del gen RSPH4A como responsables de la mayoría de los casos.
Una de estas mutaciones, la deleción c.921+3_6delAGTA, es especialmente prevalente en la población puertorriqueña.
Debido a la falta de recursos y estudios epidemiológicos detallados, los datos sobre la prevalencia de la PCD en Puerto Rico son limitados. Esto dificulta el diagnóstico temprano y la intervención oportuna, lo que a menudo retrasa el tratamiento adecuado y afecta negativamente la calidad de vida de los pacientes.
El equipo de investigación empleó muestras recolectadas de una paciente con PCD homocigota para la mutación RSPH4A, sus padres heterocigotos y un control sano.
Las muestras se prepararon en tarjetas Guthrie, un método que preserva el ADN a largo plazo en condiciones controladas. Posteriormente, se realizó:
- Cuantificación de ADN: Se utilizó el sistema QUBIT de alta sensibilidad, obteniendo concentraciones de ADN entre 2.71 y 10.1 ng/µL, valores adecuados para los análisis subsiguientes.
- Análisis de fragmentos capilares: Este análisis permitió identificar la deleción específica en ambos alelos de la paciente (256 pb), un alelo mutado y otro de tipo salvaje en los padres, y solo alelos de tipo salvaje en el control sano.
- Secuenciación de ADN: Este paso validó los resultados, confirmando la precisión y fiabilidad del ensayo en la detección de la mutación.
El ensayo basado en DBS demostró ser altamente efectivo, confiable y escalable. El protocolo detectó con precisión la mutación RSPH4A en una única muestra, validando su aplicabilidad en futuros programas de cribado masivo.
- Fiabilidad: El ensayo confirmó consistentemente la deleción específica asociada a la PCD.
- Versatilidad: La técnica es compatible con un protocolo de cribado neonatal, lo que permite su aplicación en poblaciones amplias.
- Impacto: Este método proporciona una herramienta valiosa para abordar las limitaciones actuales en la detección de enfermedades genéticas raras en Puerto Rico.
Este ensayo además de aportar para mejorar la detección temprana de la PCD, también sirve como modelo para implementar programas de cribado genético en Puerto Rico.
La inclusión de la PCD en el programa de cribado neonatal (NBS) podría identificar a pacientes y portadores desde el nacimiento, permitiendo intervenciones oportunas y mejorando la calidad de vida de los afectados.
Además, este enfoque podría replicarse en otras poblaciones con alta prevalencia de mutaciones genéticas específicas, contribuyendo a reducir las disparidades en el acceso a diagnósticos avanzados.
El estudio fue desarrollado con el apoyo de CILIA4PR, Ponce Health Sciences University y el Departamento de Biología de la Universidad de Puerto Rico en Mayagüez.
Estos resultados sientan las bases para futuros estudios epidemiológicos y programas de intervención en Puerto Rico y más allá.
